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免疫荧光


原理:

免疫荧光IF)是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。

2        实验流程:

◎       取材和组织固定;

◎       切片;

◎       脱蜡;

◎       抗原修复;

◎       血清封闭和抗体孵育;

◎      荧光二抗标记;

◎    DIPA染核;

◎       抗荧光衰减封片剂封片

2        实验要求:

1.             客户需自备一抗,本公司可代为购买一抗。

2.             客户需提供详细的样品资料(如组织来源等),以便于实验的顺利进行。

3.             技术部将在收到标本后15-20个工作日之内将作好的片子交于客户。

标本收集及注意事项:

石蜡切片:

*标本新鲜:一般在2h以内进行,超过2h,组织将有不同程度的自溶,其抗原或变性消失,或严重弥散。

 *取材部位:除取病灶或含待检抗原部位外,还应取病灶与正常交界处,即所取组织切片中同时应有抗原阳性和阴性区,以形成自身对照。

*取材后的组织需立刻投于固定剂中固定使组织和细胞的蛋白质凝固,终止内源性或外源性酶反应,防止组织自溶或异溶,以保持原有结构和形态;对免疫组化而言更有原位保存抗原的作用,避免抗原失活或弥散。

冰冻切片:

*液氮中冰冻:组织投入液氮中 C)10-20sec°(-196

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